瑞士Diaotme組織切片鉆石刀的正確使用方法與技巧,對(duì)于獲取高質(zhì)量的切片至關(guān)重要。以下是對(duì)其使用方法及技巧的詳細(xì)分享:
一、準(zhǔn)備工作
1.檢查包裝:在使用前,應(yīng)仔細(xì)檢查鉆石刀的外包裝盒是否損壞或打開(kāi)過(guò),確保鉆石刀在藍(lán)色塑料盒內(nèi),且刀刃潔凈。
2.樣品塊修整:切片前,需要對(duì)樣品塊進(jìn)行修整,以確保理想的切片。樣品塊的修整對(duì)得到高質(zhì)量的切片非常關(guān)鍵。修整后的樣品塊應(yīng)與鉆石刀的刀鋒平行,且不應(yīng)過(guò)厚,以避免增加切片時(shí)的壓力。
二、切片操作
1.室溫切片
樣本塊放置:樣本塊必須與鉆石刀的刀刃平行。
固定螺栓:樣本塊固定螺栓、刀把等都要擰緊。
鉆石刀參數(shù):切角和切速要按照說(shuō)明書(shū)的參數(shù)設(shè)定。
水槽液體:液體水平面要與鉆石刀刃水平,水槽內(nèi)的水要加到與刀刃接觸為止。使用牙簽將水槽的左右兩邊弄濕,但要注意不要碰到刀刃和粘接材料。
2.低溫切片
樣本修整與切片:使用低溫鉆石修整刀對(duì)冰凍切片、生物樣本、工業(yè)樣本進(jìn)行修整,然后使用低溫切片鉆石刀進(jìn)行切片。低溫切片時(shí),容易發(fā)生樣本粘刀、卷曲、聚團(tuán)或者漂移等問(wèn)題,主要原因是低溫腔靜電。為了解決這些問(wèn)題,可以使用Static-Line II靜電消除器。
溫度控制:修整樣本或者半薄切片時(shí)溫度為-80°C,超薄切片時(shí)溫度為-110°C至-120°C。

三、清潔與維護(hù)
1.清潔方法
方法一:使用無(wú)脂剃刀將苯乙烯棒切出一個(gè)45°斜面,用清潔棒沾取100%乙醇,抖落多余的乙醇,然后清潔棒無(wú)壓力滑過(guò)鉆石刀刃。這種方法操作簡(jiǎn)便,但要注意清潔棒不要接觸到粘結(jié)區(qū)(刀刃與基座)。
方法二:使用毛圈或睫毛移除所有切片后剩余雜物,使用蒸餾水沖洗鉆石刀,然后使用干凈的壓縮空氣吹干鉆石刀。
方法三:如果干燥的切片或殘余粘在刀刃上,可以將鉆石刀放進(jìn)蒸餾水中,加一到兩滴中性洗滌液到蒸餾水中,浸泡一晚后取出鉆石刀,再用蒸餾水清洗,最后再按照方法一的說(shuō)明進(jìn)行操作。對(duì)于低溫鉆石刀,用50%的乙醇代替100%的乙醇進(jìn)行清潔。
2.維護(hù)注意事項(xiàng)
避免使用超聲波儀清洗鉆石刀,也不要使用酸、堿或有害的溶劑(如丙酮等)清洗鉆石刀。
禁止將有機(jī)溶劑(如丙酮等)加到刀槽里,以免軟化或侵蝕刀口兩旁的封槽樹(shù)脂,造成漏水,降低水的表面張力,導(dǎo)致切片展開(kāi)不勻,使切片質(zhì)量下降。
培養(yǎng)細(xì)胞離心后的雜質(zhì)易損壞鉆石刀,因此最好不要用鉆石刀切片培養(yǎng)細(xì)胞。
切片厚度應(yīng)控制在鉆石刀所限范圍內(nèi),超薄切片厚度一般為200nm,半薄切片厚度一般為1μm,冷凍超薄切片厚度一般為1μm。
四、使用技巧
1.對(duì)刀技巧:對(duì)刀過(guò)程是按一定要求逐漸縮短標(biāo)本塊頂面與刀口間的距離,使之盡可能靠近,但絕不觸挨著。操作時(shí)應(yīng)使用切片機(jī)上的暗視野光源,利用干涉反光來(lái)判斷刀口與包埋塊之間的距離,實(shí)現(xiàn)快速、安全對(duì)刀。
2.切片控制:在切片過(guò)程中,要仔細(xì)調(diào)整切片速度、間隙角、切片厚度等參數(shù),并仔細(xì)調(diào)整刀槽里的水平面直至浸濕刀口、又有良好的反光面為最佳。
3.避免損傷:切片時(shí)應(yīng)絕對(duì)避免手指、鑷子、載網(wǎng)等硬物碰觸刀口,以免損壞刀刃。
使用瑞士Diaotme組織切片鉆石刀時(shí),需要嚴(yán)格按照操作說(shuō)明進(jìn)行,并注意清潔與維護(hù)工作。同時(shí),掌握一些使用技巧也能幫助用戶更好地使用這款鉆石刀,從而獲取高質(zhì)量的切片。